作者:芮莉莉

来源:中国人民解放军军事医学科学院博士学位论文

发表时间:2005-11-01

页数:89

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目的：本研究旨在优化茶多糖提取的最佳条件。观察茶多糖组分对II型糖尿病小鼠糖代谢的影响，并进一步探讨茶多糖组分抗糖尿病活性的初步机制。此研究为阐明茶多糖降糖组分以及作用机理提供理论基础。

方法：按正交设计方法以不同水平的固液比、温度、时间因素，采用热水浸提茶叶提取得到茶多糖粗提物，进一步经过Sevag法除蛋白、乙醇分级、CTAB沉淀等方法得到茶多糖，再经DEAE一纤维素和SephadexG一100凝胶柱层析法对茶多糖进行纯化。采用具有人类II型糖尿病特征的KK-A’糖尿病小鼠模型，检测不同水平茶多糖组分对糖尿病小鼠相关的生化和组织学指标的影响，并观察其对肿瘤坏死因子、瘦素及葡萄糖转运蛋白4表达的作用。

结果：茶多糖最佳提取条件为6倍溶液体积、温度60℃、提取时间为6h。选用6次重复Sevag法脱蛋白，得到的茶多糖含量相对较高。茶多糖经乙醇分级沉淀得到A1，A2，A3级份，A2部分占最大比例。茶多糖A2经CTAB沉淀分离到酸性多糖A2A和中性多糖A2N，A2N组分占比例较多。再分别经层析纯化得多种茶多糖。中性茶多糖A2N有改善小鼠糖、脂代谢紊乱、增加胰岛素敏感性的作用，且提高脂肪组织中GLUT4mRNA的表达和降低脂肪组织中TNF Q mRNA的表达。茶多糖A2N还能降低肌肉和脂肪组织中TNF Q、Leptin蛋白的表达和提高肌肉和脂肪组织中GLUT4蛋白的表达。

结论：粗制茶多糖的乙醇分级沉淀纯化得到茶多糖级份A1，A2，A3。茶多糖A2的CTAB沉淀分离纯化，得酸性多糖h2h和中性多糖A2N。茶多糖A2A和A2N经层析纯化得多种茶多糖组分。茶多糖A2N通过降低血糖、改善糖耐量，增加胰岛素的敏感性，同时通过影响肌肉和脂肪组织中TNF o、Leptin以及GLUT4rnRNA和蛋白的表达减轻胰岛素抵抗，改善II型糖尿病小鼠的糖代谢紊乱。

关键词：茶多糖 分离纯化 1l型糖尿病 肿瘤坏死因子 瘦素 葡萄糖转运蛋白4

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